背景
青蒿琥酯(Artesunate，ART)是一种从青蒿中提取的天然化合物，在治疗多种肿瘤方面显示出良好的临床潜力，但其确切机制尚不清楚。脉络膜黑色素瘤(Choroidal melanoma, CM)是成人眼部主要恶性肿瘤，恶性程度高，预后差，目前治疗效果有限。该研究采用网络药理学、分子对接和实验验证相结合的方法，探索ART的抗CM作用及其机制。
方法
从PubChem、Swiss Target Prediction和Traditional Medicine Systems Pharmacology (TCMSP)数据库分析平台数据库中筛选ART的潜在靶点，从Online Mendelian Inheritance in Man (OMIM)、GeneCards和DisGeNET数据库中筛选CM预后相关的靶基因。两组数据集的交集产生了参与CM的ART靶基因。对交叉靶点进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络分析，以及基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析，以确定核心靶点和关键途径。采用分子对接方法预测ART与核心靶点之间的结合相互作用。
通过CCK8、菌落形成、transwell以及流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期、活性氧(ROS)等，评价ART对CM的影响。Western blot (WB)检测ART对CM相关关键蛋白和通路的影响。最后，通过体内实验进一步验证ART对裸鼠皮下肿瘤的治疗作用。
结果
通过网络药理学方法确定了ART治疗CM的关键途径和核心靶点。分子对接结果验证了ART与这些核心靶点之间具有较强的结合亲和力。分析和预测结果表明，ART主要通过细胞凋亡等多种肿瘤相关途径对CM发挥作用。
体外实验证实，ART能显著抑制CM细胞的增殖和迁移。这是通过激活p53信号通路促进细胞凋亡，通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路导致细胞周期阻滞在G0/G1期，通过激活NRF2/HO-1信号通路增加细胞内ROS水平来实现的。此外，体内实验进一步验证了ART对CM显著的增殖抑制作用。
该研究通过网络药理学结合分子对接和体外/体内实验进行初步探索，证实ART通过促进细胞凋亡、诱导细胞周期阻滞和增加细胞内ROS水平对CM具有潜在的抗癌作用。这些发现表明，ART对CM具有显著的治疗潜力。
